Product classification
糖原系列
糖异生系列
其他系列
信号系列
土壤系列
离子系列
淀粉系列
蛋白酶系列
蔗糖系列
线粒体呼吸链系列
抗逆系列
抗氧系列
氧化系列
P450系列
糖代谢系列
脂肪酸代谢系列
酯酶系列
TCA系列
三羧酸循环系列
氮代谢系列
辅酶II 系列
谷胱甘肽系列
蛋白含量测定系列
糖酵解系列
维生素c代谢系列
过氧化氢系列
氨基酸代谢系列
ATP系列
辅酶I系列
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全蛋白提取试剂盒（中）用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，作用较为温和，可快速获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验，由于含有上述的酶抑制剂，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品仅用于科研。产品组成:
规格
储存条件
裂解液（中）
100 ml
2-8 oC
磷酸酶抑制剂（100x）
1ml
-20 oC
蛋白酶抑制剂（100x）
1 ml
PMSF（100x）
操作方法:
1、组织总蛋白的提取在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF；混匀，放置在冰上备用；称取0.1g的新鲜组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至没有明显的组织块，这个过程注意冰上操作；将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g离心30min；吸取上清至新的管中；进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。（提取好的蛋白建议保存于-80 oC，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)2、细胞总蛋白的提取裂解液的用量：107个细胞需要裂解液1ml；贴壁细胞：弃去培养基，用冷的PBS洗两次，弃去PBS，然后加入计算好的细胞裂解液；在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞，将刮离的细胞裂解液移入EP管中，颠倒裂解20-30min悬浮细胞：4 oC 400g离心收集细胞，用冷的PBS洗两次细胞，同样按细胞数加入裂解液，涡旋10s，放置冰上裂解10min，重复3-4次；裂解完毕之后，将细胞裂解液4 oC 12000g离心30min；将上清移入新的EP管中；进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。（提取好的蛋白建议保存于-80 oC，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)注意事项：实验过程，所有试剂都要需要预冷或者即融，保证操作过程中的低温环境；PSMF（有毒）现用现加，因为PMSF在水溶液中会快速降解；
备注：以上数据均来自公开文献, Solarbio暂未进行独立验证, 仅供参考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.
地 址：上海市钦江路15号14层邮 箱：solarbio
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